Leishmanioses: reaçäo de imunofluorescência indireta para pesquisa de anticorpos IgM em fraçöes de soros separados por cromatografia de gel filtraçäo / Leishmaniasis: indirect immunofluorescent test to detect IgM antibodies in serum fractions separated by gel filtraction cromatography

Um total de 143 soros de pacientes (120 da forma cutânea localizada, seis da mucocutânea e 17 com leishmaniose visceral), provenientes de ambulatórios ou de hospitais do Grande Rio de Janeiro, suspeitos de leishmaniose tegumentar ou visceral americanas, foi submetido às reaçöes de imunofluorescência indireta (RIFI-IgM e IgG). Estes soros foram selecionados porque se apresentavam com RIFI-IgG de títulos elevados ou eram RIFI-IgM reagentes no soro. Como existe a possibilidade de falsos resultados de IgM näo reagentes na presença de títulos elevados de IgG e falsos IgM reagentes, devido à presença de fator reumatóide (autoanticorpos IgM anti-IgG), utilizou-se a separaçäo das fraçöes IgM e IgG do soro destes pacientes. Para isro, procedeu-se a separaçäo destas imunoglobulinas em coluna de Sephacryl S-300, nos casos em que os soros eram IgM negativo e IgG maior ou igual a 360, com a finalidade de se detectar falsos negativos e, em soros IgM reagentes, falsos positivos. Nestes últimos, também realizou-se a prova do látex para fator reumatóide. Deste modo a RIFI-IgM da fraçäo IgM separada no Sephacryl permitiu evidenciar apenas um soro - de paciente da forma cutânea localizada (0,7 por cento) - falso negativo por provável competiçäo com títulos de anticorpos IgG elevados. Por outro lado, permitiu o encontro de 23 (16,1 por cento) soros RIFI-IgM falso-reagentes para leishmanioses, devido à presença de fator reumatóide (seis soros eram de leishmaniose mucocutânea e os 17 restantes de leishmaniose visceral). Em outros indivíduos da forma cutânea localizada (8,4 por cento) a RIFI-IgM do soro e a RIFI da fraçäo IgM eram reagentes, embora também tivessem positivos (maior ou igual a 20 U/ml) à prova do látex, como os outros 23 indivíduos anteriores. Os 107 indivíduos restantes (74,8 por cento) foram RIFI-IgM reagentes no soro e na fraçäo IgM, mas, entretanto, todos eram negativos para fator reumatóide. Todas as RIFI-IgM das fraçöes IgM eram näo-reagentes. Os resultados demonstram a utilidade da presente metodologia na obtençäo de maior confiabilidade nos testes de RIFI-IgM para leishmanioses